将龟龟的尾巴拉直,泄殖孔位置超过尾盾边缘,则公龟的成分居高。大部分物种的公龟体型都比母龟小,海岛型陆龟加拉巴戈、亚达伯拉和苏卡达则相反。有些物种的公母体型大小差异性不大,如辐射龟、红腿龟、黄腿龟等。大部分物种的公龟都比较活泼好动,母龟则较沉稳。大部分物种的公龟到了成熟期,均会有主动嗅对方泄殖孔确认性别的举动。
并不是陆龟出生之后就可以鉴别雌雄了,陆龟不同于其他种类的生物,雌雄并不会很明显,只有体重达到一定重量后,才可以开始鉴别雌雄,而且越小的龟鉴别起来越不准确,所以想要知道龟的公母,也不能过于着急。龟孵化时的温度决定龟的性别,所以人工繁殖时,也可以根据这个特性,去控制龟的性别。